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鵝源性成分(Goose)核酸試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

鵝源性成分(Goose)核酸試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
吡美莫司;匹美莫司二二茂鈦

托拉塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)酮酸

萘哌地爾四

萘哌地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)N,N-二甲基酰

厄貝沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)(2-吡啶基)-甲

更新時間:2021-03-13
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 鵝源性成分(Goose)核酸試劑盒廠家

 規(guī)格

 48T

 貨號

 LZP8146

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
Galerone (TOK001)(R)-哌-2-羧酸

山柰酚-槐二糖-7-鼠李糖苷(1S,2R)-(-)-1-氨基-2-茚

己酮可可(標(biāo)準(zhǔn)品)5,5-二甲基-1,環(huán)己二酮

波必利(標(biāo)準(zhǔn)品)酮肟

醉魚草皂苷IVb(標(biāo)準(zhǔn)品)羥基脲

二酸倍他米松(標(biāo)準(zhǔn)品)酸

厄多司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)無水醋酸鈉

吡美莫司;匹美莫司二二茂鈦

托拉塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)酮酸

萘哌地爾四

萘哌地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)N,N-二甲基酰

厄貝沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)(2-吡啶基)-甲

馬來酸替加色羅(標(biāo)準(zhǔn)品) B

三雙脒(標(biāo)準(zhǔn)品)磺酸鈉

焦地黃甙B1(標(biāo)準(zhǔn)品)1-氨基-1-環(huán)基鹽酸鹽

N-6022N-溴代丁二酰亞

巴柳氮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)N-代丁二酰亞

3,4,5-*酸(標(biāo)準(zhǔn)品)抗氧劑264

細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基11E2F1/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子E2F-1IgG100 ul

腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2E2F2/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子E2F-2IgG100 ul

酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16E2F3/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子E2F-3IgG100 ul

DNA修復(fù)酶相互作用蛋白E2F4/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子E2F-4IgG100 ul

脂肪細(xì)胞膜相關(guān)蛋白E2F5/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子E2F-5IgG100 ul

載脂蛋白A1結(jié)合蛋白E2F6/FITC  熒光素標(biāo)記抗轉(zhuǎn)錄因子E2F-6IgG100 ul

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物1E2 tag/FITC  熒光素標(biāo)記E2 tag標(biāo)簽IgG100µg

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物2E2 tag/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記E2 tag標(biāo)簽IgG100 ul

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3BE7 proin/FITC  熒光素標(biāo)記頭瘤病毒16型E7IgG20 ul
鵝源性成分(Goose)核酸試劑盒廠家多巴胺脫羧酶抗體Folic acid中文名:葉酸別名:分子式:C19H19N7O6

結(jié)蛋白抗體Amprolium hydrochloride中文名:鹽酸氨丙林別名:分子式:C14H20Cl2N4

DISC1 C端抗體4-Amiphenylarsonic acid中文名:4-氨基苯胂酸別名:分子式:C6H7AsO4

DISC1 N端抗體Furosemide中文名:別名:分子式:C12H11ClN2O5S

抑癌基因抗體Ethyl 3-(4-(methylami)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propaate中文名:別名:分子式:C18H20N4O5

 

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