Product Center
布尼亞病毒(BV)核酸試劑盒價格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:酸硫必利(標準品)*氧基谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1DLX4/FITC 熒光素標記兔抗DLX4IgG20 ulp21活化蛋白激酶ARHG7DMBT1 /FITC 熒光素標記抑癌基因IgG100 ul酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白GirdinDMT1/FITC 熒光素標記金屬離子轉(zhuǎn)運體1IgG100 ul2-氨基硫雙加氧酶Dnmt1/
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產(chǎn)品名稱 | 布尼亞病毒(BV)核酸試劑盒價格 |
規(guī)格 | 48T |
貨號 | LZP8137 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
鹽酸達克羅寧(標準品)吲哚
SGI-1027N-1-Boc-2-甲基哌
鹽酸溴己新(標準品)2-并噻唑
雷西莫特二硫化二并噻唑
羥甲煙(標準品)鄰二酚
甲酸鈉(標準品)2,二酚
對氨基水楊酸(標準品)環(huán)戊酮
曲匹布通(標準品)2-咪唑烷酮
曲匹地爾(標準品)溴-氟酚
桂美酸(標準品)溴化銨
奧拉米特(標準品)氟化銨
羥酯(對羥基甲酸酯)標準品化銨
貝美格(標準品)香蘭素
地喹銨(標準品)氫氧化鈀
硫酸氫小檗(標準品)硫化銨
度米芬(標準品)酸*酯
醋酸優(yōu)力司特;醋酸烏利司他三
鹽酸硫必利(標準品)*氧基
谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1DLX4/FITC 熒光素標記兔抗DLX4IgG20 ul
p21活化蛋白激酶ARHG7DMBT1 /FITC 熒光素標記抑癌基因IgG100 ul
酸化肌動蛋白結(jié)合蛋白GirdinDMT1/FITC 熒光素標記金屬離子轉(zhuǎn)運體1IgG100 ul
2-氨基硫雙加氧酶Dnmt1/FITC 熒光素標記DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1IgG20 ul
血管緊張素Ⅱ-1型受體Dnmt3a/FITC 熒光素標記DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3αIgG100 ul
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體Dnmt3 Beta/FITC 熒光素標記DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3βIgG100 ul
去整合素樣金屬蛋白酶19DNA-PKcs/FITC 熒光素標記DNA依賴蛋白激酶催化亞基IgG20 ul
原癌基因AF4蛋白Dok-1/FITC 熒光素標記酪氨酸激酶衰減蛋白IgG100 ul
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣1蛋白DOK 2/p56Dok2/FITC 熒光素標記抗、大、D酪氨酸激酶衰減蛋白2IgG20 ul
布尼亞病毒(BV)核酸試劑盒價格乙型肝炎表面抗原單克隆抗體(檢測)Adoxosidic acid中文名:五?;ㄜ账釀e名:分子式:C16H24O10
乙型肝炎e抗原單克隆(包被)抗體7-Deoxy-10-hydroxyloganetin中文名:別名:分子式:C11H16O5
乙型肝炎e抗原單克?。z測)抗體Gelidoside中文名:別名:Rindoside分子式:C35H42O21
絨毛膜促性腺激素α 亞基單抗Verbenalin中文名:馬鞭草苷別名:Cornin; 山茱萸苷分子式:C17H24O10
缺氧誘導基因1蛋白抗體4''-Hydroxyisojasminin中文名:別名:分子式:C26H38O13