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伴放線放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:豬去氧膽酸植酸芝麻林素
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱 | 伴放線放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Actinobacillus actinomycetemcomitansPCR |
貨號(hào) | LZP6333 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)elisa試劑盒Anti-AGER Antibody(原貨號(hào)PB0530)研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)elisa試劑盒Anti-AGFG1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架
人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)elisa試劑盒Anti-AGO1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白
人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)elisa試劑盒Anti-AGO2 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
人補(bǔ)體片斷5b(C5b)elisa試劑盒Anti-AGO4 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細(xì)胞外基質(zhì)
人丙二醛(MDA)elisa試劑盒Anti-AGRP Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué)
人鞭毛蛋白(flagellin)elisa試劑盒Anti-AGRN Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞粘附分子 細(xì)胞外基質(zhì)
人臂板蛋白3A(Sema 3A)elisa試劑盒Anti-AGR2 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 細(xì)胞外基質(zhì)
人白介素26(IL-26)elisa試劑盒Anti-AGT Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架 細(xì)胞外基質(zhì)
人γ干擾素(IFN-γ)抗體elisa試劑盒Anti-AHR Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)elisa試劑盒Anti-AGT Antibody研究領(lǐng)域 心血管 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 血管內(nèi)皮細(xì)胞
人α2巨球蛋白(α2-MG)elisa試劑盒Anti-AHR Antibody研究領(lǐng)域 心血管 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白
人Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa試劑盒Anti-AGTR1 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白
人T細(xì)胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)elisa試劑盒Anti-AHR Antibody研究領(lǐng)域 心血管 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白
人N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)elisa試劑盒Anti-AGTR1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 G蛋白信號(hào)
ShigellaBroth
NTM培養(yǎng)基 250g 淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
TCBS瓊脂 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 250 致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基250g/瓶細(xì)菌的鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)incubationmedia鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基250g/瓶細(xì)菌的鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)
Endo培養(yǎng)基 Endo Agar 250克 大腸菌群的檢測(cè)
RVS肉湯 RVS Broth 250克 食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌
MKTTN肉湯 MKTTN Broth 250克 食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌
LIA瓊脂 Lysine Iron Agar 250克 食品中沙門(mén)氏菌生化試驗(yàn)
伴放線放線桿菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格人類(lèi)白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukocyte antigen E,HLA-E ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人類(lèi)白細(xì)胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukocyte antigen G,HLA-G ELISA Kit *
人類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒英文名稱:Human rheumatoid factor,RF ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人類(lèi)似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒英文名稱:human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA Kit *
人類(lèi)似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒英文名稱:human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA Kit*
人類(lèi)似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒英文名稱:human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA Kit*小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin2(Eotaxin2/CCL24)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒 組裝/原裝
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。