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COLO205細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

COLO205細(xì)胞公司相關(guān)產(chǎn)品:
甘氨酸受體α1+甘氨酸受體α2抗體MGr1-Ag/37LRP /FITC 熒光素標(biāo)記層粘連蛋白受體1抗體(C端)IgG
甘氨酸受體α3/GlyR α3抗體MICA/FITC 熒光素標(biāo)記一種應(yīng)激分子抗體IgG

更新時間:2021-08-30
訪問次數(shù):763

產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

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產(chǎn)品名稱:結(jié)腸癌細(xì)胞;COLO205
英文簡稱:COLO205細(xì)胞

貨號:LZ-X968343
規(guī)格:T25
生長特性:懸浮

圖片2.jpg 

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價,產(chǎn)品貨期短,價格優(yōu),售后齊全。

凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

圖片2.jpg 

實(shí)驗(yàn)材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個;
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺;

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
   1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng):
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,但為取得良好的使用效果,3-6個月內(nèi)推薦4℃保存,并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染,會嚴(yán)重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測,時間過長可能會導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過程中使用了胰酶,需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC,導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,在進(jìn)行熒光觀察時,盡量縮短觀察時間,同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測時,如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細(xì)胞,并且通過調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無法改善,可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測,這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
綿羊β-微管蛋白(TUBβ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-溴-2,4,6-三氟苯Paraburkholderia sp.用途: 植物病原物,為該病害防治提供依據(jù)。

綿羊血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1-溴-2,4,6-三氟苯葡萄白腐菌(可訂購)拉丁屬名: Microdochium nivale

綿羊激酶M2型同工酶(PKM2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-BOC-O-芐-L-絲氨雪腐微座孢拉丁屬名: Streptomyces pactum

綿羊松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-BOC-O-芐-L-絲氨密旋鏈霉菌拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

綿羊角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  5-氟-2-釀酒酵母拉丁屬名: Staphylococcus sciuri

綿羊糖蛋白V(GP5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 5-氟-2-松鼠葡萄球菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

綿羊尿蛋白(UP)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒5-氟-2-Pseudomonas batumici 拉丁屬名: Kazachstania exigua

綿羊損傷分子1(KIM-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-氟-4-少孢哈薩克斯坦酵母拉丁屬名: Isaria fumosorosea

綿羊骨成型蛋白受體II(BMPR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-氟-4-玫煙色棒束孢拉丁屬名: Bacillus sp.

綿羊分裂周期蛋白23(CDC23)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-3-吡啶Bacillus sp.拉丁屬名: Pseudoalteromonas marina

綿羊6-羥多巴(6-OHDA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  2-氟-3-吡啶海假交替單胞菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

綿羊低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-吡啶多主葡萄殼菌用途: 分類、研究,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。

綿羊質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氟-5-吡啶芽胞桿菌拉丁屬名: Paenibacillus  polymyxa

綿羊腫瘤特異性移植抗原(TSTA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-硝-7-氮雜吲哚多粘類芽孢桿菌拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus

綿羊抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒環(huán)溴化鎂金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

綿羊碳酐酶I(CA1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-乙氧肉桂釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus  subtilis
COLO205細(xì)胞雞周期素B(CCNB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-Crk p38 (phospho Y221) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Crk p38抗體IgG

雞原纖維蛋白1(FBN1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-DAT1/FITC  熒光素標(biāo)記抗多巴相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgG

雞激肽釋放酶6(KLK6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DBH /FITC  熒光素標(biāo)記多巴β羥化酶抗體IgG

雞凋亡蛋白酶激活因子1(APAF-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Anti-DCC/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗結(jié)直腸癌缺失因抗體IgG

雞視網(wǎng)膜母瘤蛋白1(RB1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-LAMP/LAMP-3/CD208/FITC  熒光素標(biāo)記CD208抗體IgG

雞心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-SIGN/CD209/CLEC4L/FITC  熒光素標(biāo)記CD209抗體IgG

雞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-DC-SIGNR/CD299/FITC  熒光素標(biāo)記CD299抗體IgG

雞脂筏特征蛋白2(FLOT2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  Anti-DCIR/CLEC4A/FITC  熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體IgG


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