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kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)的銷售產(chǎn)品:G氨丁受體β2/GABAA Rβ2抗體Neurofascin-155/FITC 熒光素標記神經(jīng)束蛋白-155抗體IgGG蛋白偶聯(lián)受體17抗體NF2/merlin /FITC 熒光素標記2型神經(jīng)纖維瘤抗體IgG7660-25-5標準品動物組織β-半乳糖活性超敏熒光定量檢測試劑盒次黃CAS:68-94-0細菌β-半乳糖活性超敏
產(chǎn)品分類
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kFlour555 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒,細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎實驗手段。精確的檢測細胞增殖方法是BrdU法。EdU法檢測試劑盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧niao嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。EdU法檢測是基于“點擊"反應,一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴的原子共價反應。本試劑盒中,EdU試劑含有炔烴,而kFlour555染料試劑含有疊氮化合物。點擊法的EdU標記增殖快速有效,易于使用。只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的EdU。標準化的固定和去污劑促滲可以使檢測試劑進入細胞,而brdu方法則需要DNA變性(如酸變性、熱變性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,從而方便BrdU抗體結合。 |
中文名稱:kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10T|20T|50T
產(chǎn)品貨號:LZ-01X6430
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
無孢蛋白(ASPN)英文名稱:ASPN ELISA Kit色c氧化1抗體包裝25ml
吻受體(KISS1R)英文名稱:KISS1R ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白4抗體包裝5ml
吻1(KISS1)英文名稱:KISS1 ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白6抗體包裝1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名稱:GIP ELISA Kit表面趨化因子受體4相關蛋白8抗體包裝5g
胃泌(GT)英文名稱:GT ELISA Kit硫軟骨抗體包裝100g
胃蛋白原C(PGC)英文名稱:PGC ELISA Kit上皮類癌相關抗原抗體包裝25g
胃蛋白原A(PGA)英文名稱:PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g
味覺受體1型成員2(TAS1R2)英文名稱:TAS1R2 ELISA Kit著絲粒蛋白K包裝100g
尾加壓2受體(UTS2R)英文名稱:UTS2R ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝25g
維生D受體(VDR)英文名稱:VDR ELISA Kit轉鐵蛋白受體抗體包裝5g
維生D結合蛋白(DBP)英文名稱:DBP ELISA Kit8號染色體開放閱讀框K29抗體包裝1g
維生B9(VB9)英文名稱:VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝250mg
維X受體α(RXRα)英文名稱:RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗體包裝5g
圍脂滴蛋白4(PLIN4)英文名稱:PLIN4 ELISA KitCD33抗體包裝1g
微粒體S轉移1(MGST1)英文名稱:MGST1 ELISA Kit視網(wǎng)膜母瘤結合蛋白8抗體包裝5g
彼爾姆短桿菌Brevibacterium│permense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品組織蛋白G試劑盒風疹病IgG抗體參考品
銀耳Tremella│fuciformis 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%組織蛋白D試劑盒風疹病IgM抗體參考品
筑波鏈霉菌Streptomyces│tsukubaensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97.0%,標準品組織蛋白C試劑盒紫堇塊莖堿;Corytuberine
kFluor555-EdU法細胞增殖檢測試劑盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯維生B12Elisa
白酒 酒精度 3,4,5-三噠維生B2Elisa
桔綠木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯維生B6Elisa
線蟲被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮維生CElisa
枯草芽孢桿 4-苯乙維生DElisa
紫紅曲霉 2,4-二溴-6-氟苯維生D2Elisa
釀酒酵母 2-苯乙鹽酸鹽維生D3Elisa
塔賓曲霉 4--3-乙基維生D受體Elisa
釀酒酵母 單水合物維生EElisa
pAAV-RC2 4--2-氟苯磺酰維生K1Elisa
蕈狀芽孢桿 己二酸二乙酯維生K2Elisa
光黑腹 丁酸香茅酯尾加壓Ⅱ相關肽Elisa
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加壓IIElisa
草木樨中華根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-AgElisa
雞葡萄球 環(huán)己烯-1-酸頻哪酯胃腸癌標志物CA199Elisa