染料法qPCR試劑盒因其試劑不亂、易保留,操縱簡便,結果判定較客觀等因素,已廣泛用于免疫學檢測的各領域中。然而,影響試驗結果的因素良多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分施展其方法學的長處。
染料法qPCR試劑盒在測定抗原時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既留存其免疫學活性,又留存酶的活性。
染料法qPCR試劑盒測抗原時的注意事項如下:
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,在保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑盒的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。